| (57) | Abrégé : La présente invention concerne de manière générale des systèmes et des procédés appropriés pour une production protéinique de niveau élevé. Tandis qu'un ou plusieurs éléments de la présente invention sont dérivés d'un alphavirus, la présente invention ne nécessite pas de propagation de particules virales. En particulier, un système comprenant deux molécules d'ARN séparées est prévu, comprenant chacune une séquence nucléotidique dérivée d'un alphavirus : une molécule d'ARN comprend une construction d'ARN pour exprimer une réplicase d'alphavirus et une molécule d'ARN comprend un réplicon d'ARN qui peut être répliqué par la réplicase en trans. La construction d'ARN pour exprimer une réplicase d'alphavirus comprend une coiffe en position 5'. Il a été découvert de manière surprenante que la coiffe en position 5' est appropriée pour entraîner efficacement l'expression d'un transgène à partir du réplicon en trans. Le système de la présente invention permet l'expression d'une protéine d'intérêt dans une cellule ou un organisme, mais n'est pas associé à une formation non souhaitée de particules virales. Par conséquent, la présente invention est appropriée pour une production efficace et sûre d'une protéine d'intérêt, par exemple une protéine thérapeutique ou une protéine antigénique, telle qu'un vaccin, dans un organisme cible. L'invention concerne des procédés respectifs de production de protéines in vitro et in vivo ainsi que des utilisations médicales. La présente invention concerne également un ADN codant pour les molécules d'ARN de l'invention et des cellules comprenant les molécules d'ARN de l'invention. |
